5L uzluksiz oqim termostatik ultrasonik homogenizator sonikatori
Nov 03, 2018
Xabar QOLDIRISH
Streptomycesda ultratovushli homogenizatorlar sonikatorini qo'llash
Q: Streptomyces ultrasonikatsiyasining shartlari qanday?
Javob: Oldindan davolash odatda bakterial suspenziya konsentratsiyasi sifatida tuziladi. Ultrasonik buzilish ultrasonik hujayra pulverizatori yordamida amalga oshirildi. Hozirgi vaqtda qabul qilingan maxsus shartlar quyidagilardir:
1. Bakteriyalar 24 soatlik madaniy vosita hujayralarni to'plash uchun 5 daqiqa davomida 5 000 r / min da santrifüj qilingan.
2. Na2HPO-NaH2PO bufer pH 7.5 bilan 3 marta yuving va keyin bu tampon bilan bakteriyalarni 1: 3 suspenziyaga aralashtiring. 40 ml katta plastmassa sinov naychasiga joylashtirilgan.
3. Katta plastmassa sinov naychasini muz hammomiga joylashtiring va sinishi uchun ultratovush ishlatiladi (kuchlanish 200 Vt, 1/2 "prob, 30 soniya davomida kesilib, intervalgacha 30 S).
4. Eritilgan suyuqlik hujayra debris va supernatantni to'plash uchun yuqori tezlikda 30 minut davomida 12 000 r / min da santrifugal qilindi. Ultrasonik buzilmaslik jarayoni asosan yuqoridagi kabi bo'lgan, ya'ni yuvilgan hujayralar ham oldindan sovutilgan fiziologik tuzli yoki pH 8 Tris bo'lishi mumkin. -HCl, bir marta yuving. Bundan tashqari, ultratovush dozasi namunalar miqdori va bakteriyalar bilan juda katta farq qiladi. Quvvat 400-600w ga etishi, 5 soniyadan oshishi, 5 soniya uchun to'xtash, muz hammomini to'ldirish va 1 mM yakuniy konsentratsiyasi bilan PMSF qo'shishi mumkin. Kerakli vaqtda ultratovush intensivligini va chastotasini aniqlash uchun mikroskopik tekshiruvni kuzatib borish kerak, chunki hujayralar butunlay buzilganmi. Actinomitsalar prokaryotik tizimlarning filogenetik daraxti bo'yicha yuqori (G + C) molar ulushli (mol%) Gram-pozitiv bakteriyalar jinsiga mansub. E. coli ultratovushini qo'llash paytida, 400W ultrasonik hujayra pulverizatori ishlatiladi va super 5 stop 5 usuli yaxshi, lekin u Streptomycesga hech qanday ta'sir ko'rsatmaydi. U hujayra devori tarkibidagi farqlardan kelib chiqadi, chunki E. coli Gram-salbiy bakteriyadir.
Proudct Photo
