Xost hujayralarining qoldiq DNK namunasini tayyorlash dasturi
May 21, 2021
Xabar QOLDIRISH
Rekombinant oqsilli dorilar, antikorlarga qarshi dorilar, vaktsinalar va biologik mahsulotdagi boshqa mahsulotlar doimiy hujayralar liniyalari orqali ifodalanadi va ishlab chiqariladi. Ular qat'iy tozalash jarayonlarini boshdan kechirgan bo'lsalar ham, mahsulotlarda qoldiq xujayrali DNK bo'laklari (rDNK) bo'lishi mumkin.
Ushbu rDNK retseptorning asosiy genlarining ishiga ta'sir qilishi va shu bilan yuqumli yoki o'simgenlik xavfini tug'dirishi mumkin.
Shuning uchun namunadagi rDNK izini qanday samarali va barqaror ravishda olish juda muhimdir. Hozirgi vaqtda asosan quyidagi usullar mavjud:
| Usullari | Afzalligi | Kamchilik |
| Fenol / xloroform | Yuqori DNK tozaligi va yuqori tarkibi | Vaqtni talab qiluvchi, noqulay qadamlar va toksik |
| Natriy yodid yog'inlari | foydalanish oson | Ko'p vaqt talab qiluvchi va beqaror DNK tarkibi |
| Ustun usuli | Oddiy va yuqori poklik | Vaqt talab qiluvchi va avtomatlashtirish qiyin |
| Magnitli boncuk usuli | Oddiy, yuqori tozaligi, avtomatlashtirilishi mumkin | - |
 |
Ushbu davolash sxemasi magnitli boncuklar usuli printsipiga asoslangan va samarali, sodda va avtomatlashtirilgan oldindan ishlov berish tizimini amalga oshiradigan rDNA biologik mahsulotlarni oldindan davolash tizimida qo'llaniladi.
SCIENTZ avtomatik nuklein kislota ekstraktsiyalash vositasi taniqli xost hujayralari qoldiqlari DNK namunalarini oldindan davolash to'plami bilan jihozlangan (magnitli boncuklar usuli) va har xil namunalarning tiklanish darajasi 80% dan yuqori bo'lib, ular barqaror va samarali boshqarilishi mumkin. turli xil biologik mahsulotlarda mezbon hujayra DNKning qoldiq tarkibi
Eksperimental dastur
Eksperimental materiallar: avtomatik nuklein kislota ekstraktsiyalash vositasi (NP-2032), lyuminestsent miqdoriy PCR vositasi (LightCycler480), xujayraning qoldiq DNK namunasini oldindan davolash to'plami (magnitli boncuk usuli), CAR / TCR gen nusxasini aniqlash vositasi (multipleks PCR - Flüoresans prob usuli) )
Eksperimental namunalar: retrovirus namunalari, CAR-T hujayralari namunalari, salbiy nazorat
Tajriba bosqichlari:
Monitoring uchun.
Eksperimentni tayyorlash - namunani tayyorlash - ekstraktsiyalashga tayyorgarlik - dastur boshlanishi - qoldiq tarkibini aniqlash
Izohlar: asbob taxminan 30 daqiqa ishlaydi
Eksperimental natijalar:
| Namuna nomi | MeanCp | O'rtacha | Miqdor tiklandi | Skalar | Qayta tiklash darajasi |
| Salbiy nazorat | 36.43 | 0.00 | - | - | - |
| Salbiy nazorat + (ko'chma) | 18.67 | 86.62 | 8662.15 | 9707.85 | 89% |
| Salbiy nazorat | 18.72 | 53.47 | 8020.723657 | 9868.821045 | 81% |
| Virus namunasi + | 19.15 | 63.10 | 8194.27 | 9707.85 | 84% |
| Hujayra namunasi | 20.21 | 32.93 | 2811.241943 | 2740.516576 | 102% |
Eksperimental natijalar:
Turli namunalarni avtomatlashtirilgan tarzda qayta ishlash barqaror va samarali natijalarga ega;
Partiyani qayta ishlashni avtomatlashtirish samaradorligi qo'lda qazib olish samaradorligidan yuqori;
U USP-ning yangi tiklanish darajasi talablariga javob beradi; biologik mahsulotlarda rDNKni aniqlashni oldindan qayta ishlash uchun yaxshi yordamchi bo'lishi mumkin.
Mahsulot namoyishi:
 |